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        偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

        產品簡介

        偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格
        上海聯(lián)祖生物相關產品:
        SNAI2檢測試劑盒
        Nrf2 peptide 核因子2相關因子2抗原
        NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原

        更新時間:2021-03-14
        訪問次數(shù):533
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        注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

         產品名稱

         偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格

         英文名稱

         Covert Mortality Nodavirus(CMNV)RTPCR

         貨號

         LZP6616

        組成及試劑配制:
        1、酶標板:一塊(96孔)
        2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        甲基葡萄糖保存Anti-Transketolase/TKT Antibody蛋白分子量  predicted molecular weight: 14kDa

        D-阿拉伯糖保存Anti-TREM1 Antibody研究領域  免疫學 信號轉導 結合蛋白 細胞骨架

        糖原使用說明書Anti-TREM1 Antibody研究領域  腫瘤 信號轉導 細胞類型標志物

        N-甲基-D-葡糖胺實驗步驟Anti-TREM1 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學

        D-半乳糖實驗步驟Anti-TREM1 Antibody研究領域  免疫學 糖蛋白 細胞類型標志物

        5-鳥苷三磷酸三鈉鹽價格Anti-TRAP1 Antibody研究領域  免疫學 細胞表面分子 糖蛋白

        花寶3號實驗步驟Anti-TREM1 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學

        乙酸-β-萘酯實驗步驟Anti-TREM1 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學

        3-氯殺螨醇使用說明書Anti-TREML1 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學

        牛膽酸價格Anti-TREX1 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞周期蛋白

        豬膽汁粉實驗步驟Anti-TREX2 Antibody研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞周期蛋白

        酚酞單磷酸環(huán)己胺鹽使用說明書Anti-TRIB2 Antibody(原貨號PB0946)研究領域  細胞生物 免疫學

        miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×1.5mL多少錢Anti-TRIM28 Antibody(原貨號PB0848)研究領域  腫瘤 細胞生物 免疫學 細胞表面分子 細胞類型標志物

        顯影定影套裝1套說明書Anti-TRIM24 Antibody研究領域  細胞生物 免疫學

        鹿特定基因序列PCR檢測試劑盒保存Anti-TRIM25 Antibody產品類型  一抗

        2-基苯酚-5-(N,N-二甲基)磺酰胺  8-基  中性樹膠

        3,4-二-1,2,5-噻二唑  4-乙?;鶈徇? 3-乙?;绶?/span>

        1,2-辛二醇  N-(3-丙基)嗎啉  2,5-二-3-乙酰基噻吩

        3--6-苯基噠嗪  乙酸  2-乙?;?5-噻酚

        Permethrin  菊酯  52645-53-1

        Strontium nitrate  鍶  10042-76-9

        Bifenthrin  聯(lián)苯菊酯  82657-04-3

        大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

        人胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒 Human Thymosin α1 ELISA Kit

        軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgA ELISA Kit

        RatL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA試劑盒大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

        HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

        HumanLegionellapneumophilaaigen,LPAgELISAKit人軍團菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
        偷死野田村病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格2-Phenylbenzimidazole,97%通用試劑 5G

        4-Methylthiazole,99%通用試劑 5G

        2,2′-Dithiobis(benzothiazole),99%通用試劑 25G

        2-Mercapto-1,3,4-thiadiazole,98%通用試劑 10G

        2-Mercapto-5-methyl-1,3,4-thiadiazole,...通用試劑 25G

        2-Benzimidazolemethal,97%通用試劑 1G

        2,5-Bis(5-tert-?butyl-?benzoxazol-?2-?...通用試劑 5G

        5-Nitroindazole,≥99%通用試劑 25G

        3-Amipyrazole-4-carbonitrile,97%通用試劑 5G

        Thiazolidine,95%通用試劑 1G

        5-(Benzylthio)-1H-tetrazole,≥99.0%通用試劑 1G

        2-(Trimethylsilyl)thiazole,96%通用試劑 1ML

        4-Ami-4H-1,2,4-triazole,99%通用試劑 5G

        3-Ami-1,2,4-triazole,≥95%通用試劑 25G

        5-Amiindazole,97%通用試劑 5G
        檢測步驟:
        一、 試劑的準備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
        試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
        熒光PCR反應液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應條件
        將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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