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        火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格

        產(chǎn)品簡介

        火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        CK檢測試劑盒 在早期由于尚未建立對(duì)蛋白質(zhì)抗原進(jìn)行分析的方法,為研究抗原性的化學(xué)本質(zhì)造成了困難

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問次數(shù):475
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        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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         產(chǎn)品名稱

         火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格

         英文名稱

         Mycoplasma meleagridisPCR

         貨號(hào)

         LZP7036

        實(shí)驗(yàn)過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
        淋巴細(xì)胞分離液使用說明書Anti-Manic Fringe/MFNG研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 新陳代謝

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        大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa試劑盒Anti-MISRII/AMHR2研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞類型標(biāo)志物 細(xì)胞骨架 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物 細(xì)胞外基質(zhì)

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        銀杏內(nèi)酯JMK(Midkine)  中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗原TNFRSF12A/TWEAKR/CD266  腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體

        特女貞苷MLC/Myosin light chain 3 peptide  肌球蛋白輕鏈3抗原TNFR2/TRAF2/CD120b  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體

        京尼平苷酸MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor)  巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗原TNFR1/TNF Receptor I  腫瘤壞死因子受體1抗體

        川續(xù)斷皂苷乙MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta)  巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗原TNFC/lymphotoxin Beta  腫瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體

        山梔苷甲酯CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta)  CD122/白介素2受體β鏈抗原TNF-alpha(1F6)  腫瘤壞死因子-α單克隆抗體

        表告依春MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2)  巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗原TNF-alpha  腫瘤壞死因子-α抗體

        大車前苷MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13)  基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原TNFAIP8  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體

        8-O-乙酰山梔苷甲酯MMP-20(matrix metalloproteinase 20)  基質(zhì)金屬蛋白酶20抗原TNFAIP5/Pentraxin 3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5

        晶蘭苷MMP-17(Matrix metalloproteinase-17)  基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體

        黃杞苷MMP-26(Matrix metalloproteinase-26)  基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原TNFAIP3  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體
        火雞支原體PCR檢測試劑盒規(guī)格β乳糖蛋白抗體IgGELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

        β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1750ku

        β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

        β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

        β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

        β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

        γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光100克

        γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃25毫克

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