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        6T-CA-M細胞

        產品簡介

        6T-CA-M細胞公司相關產品:
        F-box蛋白家族FBXO18抗體IL-13Ra2/FITC 熒光素標記白介素-13受體a2抗體IgG
        FRG2B蛋白抗體IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光素標記抗白介素14抗體IgG

        更新時間:2021-08-30
        訪問次數:921
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        注意事項:
             盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融。
             如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。
             染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
             如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗。
             熒光物質均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
             用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通??梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
             需自備PBS。
             本產品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
             為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
        產品名稱:T細胞白血病細胞
        英文簡稱:6T-CA-M細胞

        貨號:LZ-X969456
        規(guī)格:T25
        生長特性:懸浮

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        凍存培養(yǎng)基:
        凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
        1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
        2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
        培養(yǎng)細胞凍存方案:
        以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
        1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
        2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
        3.采用、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
        4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
        注:離心速度和時間取決于細胞種類。
        5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
        6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
        7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

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        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
           1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
           2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
           3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
           4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
           5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
           1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
           2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
           3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
           4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
           5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
           6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
        鏡下觀察圖像并拍照。
        實驗材料: 
        1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
        2. 100ml滅菌燒杯2個;
        3、50ml離心筒2個 
        4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
        5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
        6、細胞計數板1塊; 
        7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
        8、酒精燈1臺;

        深紅酵母10-羥基攀援山橙堿;10-Hydrox血瓊脂基礎谷氨酸受體1抗體

        粘紅酵母23-羥基白樺酸;Anemosapoge無菌脫纖維綿羊血谷氨酸受體2A抗體

        土星漢遜酵母青蒿酸;Artemisinicacid血瓊脂平板谷氨酸受體2B抗體

        杰丁漢遜酵母去氧穿心蓮內酯;DeoxyandrogrSIM動力培養(yǎng)基谷氨酸受體2C抗體

        阿拉伯糖漢遜酵母羥基積雪草酸;madecassicacSIM動力試驗管谷氨酸受體2D抗體

        健強地霉羥基芫花素;hydroxygenkwan硝酸鹽肉湯原癌基因抗體

        產朊假絲酵母7-羥基馬兜鈴酸A;7-hydroxy培養(yǎng)基核因子2相關因子2抗體

        熱帶假絲酵母5-羥基馬鞭草苷;hastatosid無菌硝酸鹽肉湯神經纖毛蛋白-1抗體

        近平滑假絲酵母去甲氧基醉椒素;demethoxyyan硝酸鹽還原試劑神經纖毛蛋白-2抗體

        葡萄芽假絲酵母去芹菜糖桔梗皂苷D;Deapio-pla緩沖葡萄糖蛋白胨水核小體結合蛋白1抗體

        間型酒香酵母千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷甲基紅試劑神經元特異性烯化酶抗體

        貝酵母千金子二萜二乙酰苯甲酰酯;5,15-DV-P試劑神經營養(yǎng)因子-3抗體

        斯氏油脂酵母芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;A甘露發(fā)酵管神經生長因子4/5抗體

        粉狀畢赤酵母去氫二異丁香酚;Dehydrodiiso鼠李糖發(fā)酵管神經生長因子抗體

        白球擬酵母5-羥甲基糠;5-Hydroxymet腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)核受體相關因子-1抗體
        6T-CA-M細胞微管相關同源蛋白TPX2抗體正丁苯酞 BUTYLPHTHALIDE, 3-n-(P)Human, Mouse, Rat

        神經死亡誘導蛋白激酶抗體正丁苯酞 BUTYLPHTHALIDE, 3-n-(P)Human, Mouse

        微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β19-丁-墨角藻黃素 BUT-FUCOXANTHIN, 19'-(SH)Human, Mouse, Rat

        轉化性卷曲含蛋白質2紫鉚因 BUTEIN(P)Human, Mouse

        小鼠抗促狀腺素抗體紫鉚因 BUTEIN(P)Human, Mouse

        腦源性tau蛋白激酶抗體紫鉚因 BUTEIN(P)Human, Mouse, Rat

        破傷風素重鏈抗體正丁 BUTYL ALCOHOL(SG)Human, Mouse, Rat

        移換酶樣蛋白1抗體乙丁酯 BUTYL ACETATE(SG)Human, Mouse, Rat

        膜型絲氨蛋白酶2抗體2,3-丁二 BUTANEDIOL, 2,3-(SG)Human, Mouse

         


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